r
Полагаю, не все протоколы приготовления компетентных клеток так работают, но мне неоднократно рассказывали о регулярном использовании подобной практики, - сам я тоже не увлекался проверкой ))
Size: a a a
2020 July 31
TF
Они трансформируюся и просто после инкубации ДНК с компетентными клетками 💁♂
Еще такое дело, что компетешки быстру мрут, пусть даже во льду
A
Полагаю, не все протоколы приготовления компетентных клеток так работают, но мне неоднократно рассказывали о регулярном использовании подобной практики, - сам я тоже не увлекался проверкой ))
Мы иногда делаем TSS трансформацию, там без хитшока
2020 August 01
TF
Мы иногда делаем TSS трансформацию, там без хитшока
А это как? Я только хитшок и электропорацию знаю
MN
подскажите, впервые работаю с клеточками, эукариотические и прокариотические нужно хранить ведь -80 или жидкий азот (или в парах азота?), так? и второй вопрос: нужно последовательно их морозить, сначала -20, потом -80, потом уже LN2?
MN
присматриваюсь к криохранилищу Thermo Scientific BioCane
ОЗ
подскажите, впервые работаю с клеточками, эукариотические и прокариотические нужно хранить ведь -80 или жидкий азот (или в парах азота?), так? и второй вопрос: нужно последовательно их морозить, сначала -20, потом -80, потом уже LN2?
Обычно эшерихии можно без подготовки, сразу -80, но если культура проблемная то +4, -20, -80 последовательно
MN
так проблема в том, что нет холодоса -80
MN
Оксана Зленко
Обычно эшерихии можно без подготовки, сразу -80, но если культура проблемная то +4, -20, -80 последовательно
ecoli есть такие XL1-Blue химические
VS
так проблема в том, что нет холодоса -80
Ищи, без него никак
MN
Ищи, без него никак
не понял, никак для каких целей?
MN
можно ли без подготовки XL1-Blue химические сразу в криохранилище?
TF
подскажите, впервые работаю с клеточками, эукариотические и прокариотические нужно хранить ведь -80 или жидкий азот (или в парах азота?), так? и второй вопрос: нужно последовательно их морозить, сначала -20, потом -80, потом уже LN2?
В зависимости от ситуации: можно изо льда на -80, а можно вначале в баночку с жидким азотом кинуть. Как понимаю, эукариотические линии лучше хранить в резервуаре с жидким азотом, но это конечно намного дороже.
DK
подскажите, впервые работаю с клеточками, эукариотические и прокариотические нужно хранить ведь -80 или жидкий азот (или в парах азота?), так? и второй вопрос: нужно последовательно их морозить, сначала -20, потом -80, потом уже LN2?
эукариоты - замораживать с 10% DMSO по -1 градусу в час, на след сутки кладешь в пары азота
прокариоты - 20% глицерол и делай с ними что хош, обычно хранят в -80
прокариоты - 20% глицерол и делай с ними что хош, обычно хранят в -80
MN
В зависимости от ситуации: можно изо льда на -80, а можно вначале в баночку с жидким азотом кинуть. Как понимаю, эукариотические линии лучше хранить в резервуаре с жидким азотом, но это конечно намного дороже.
холодос на -80 дороже криохранилища?
TF
холодос на -80 дороже криохранилища?
Резервуар с жидким азотом, который на постоянку -- криохранилище и есть, просто слово умное забыла) И да, конечно же оно дороже, чем просто мощная морозилка. Но вопрос, смотря для чего это надо.
MN
криохранилище для долговременного хранения стоит в районе 500$ на 20 литров и хранит 7 месяцев без доливания (как пишет производитель)
TF
криохранилище для долговременного хранения стоит в районе 500$ на 20 литров и хранит 7 месяцев без доливания (как пишет производитель)
Мы такое пользуем для человеческих клеточных линий. Дрожжи же и бактерии прекрасно хранятся на -80
TF
криохранилище для долговременного хранения стоит в районе 500$ на 20 литров и хранит 7 месяцев без доливания (как пишет производитель)
Все-таки и жидкий азот небесплатен, а его там надо много.
MN
Все-таки и жидкий азот небесплатен, а его там надо много.
1 л - 100 руб